Vortexing sal nie jou RNA skeer nie om dit onbruikbaar te maak as jy ewekansige priming RT doen - net as jy lang mRNA wil kloon. Die Invitrogen tegniese ondersteuning is ook korrek. Chloroform is swaarder as Trizol en sal na die onderkant van die buis sink.
Is dit veilig om RNA te vortex?
Moenie Trizol-lisate of RNA-monsters vortex om skeer te vermy nie. Na ekstraksie, hou RNA-monsters te alle tye op ys. Hierdie protokol is ontwerp vir monsters wat 1mL Trizol in 'n 1.5 of 2mL buis gelys is.
Kan jy RNA verhit?
Vermy dus hoë temperature ( bo +65°C) aangesien dit die integriteit van die RNA beïnvloed. In plaas daarvan, om sekondêre strukture uit te smelt, verhit RNA tot +65°C vir 15 minute in die teenwoordigheid van denaturerende buffers.
Hoe hersuspendeer jy RNA-korrels?
hersuspendeer jou korrel met warm water (40-50 grade Celsius). inkubeer in 45 grade celc vir 10 min. plaas hulle in +4 vir 4-6 uur.
Hoe presipiteer jy RNA?
A.
Nadat die soutkonsentrasie aangepas is, kan die RNA gepresipiteer word deur by te voeg 2.5 volumes etanol of 1 volume isopropanol en deeglik te meng, gevolg deur verkoeling vir ten minste 15 minute by -20° C.
