Om nie-spesifieke teenliggaampiesbinding te verminder en gevolglik agtergrondsein te verminder, word dit aanbeveel om 'n blokkeeroplossing te gebruik voor inkubasie met teenliggaampies Die mees doeltreffende blokkeeroplossing sal wees dit wat serum bevat van dieselfde spesie waarin die sekondêre teenliggaam opgewek is.
Hoe voorkom jy agtergrondvlekke?
Vermindering van die dikte van weefselseksies kan help om agtergrondkleuring te verminder. Probeer dunner dele sny vir skoner IHC. Dit is ook belangrik om versigtig te wees om nie gedeeltes te laat uitdroog nie, aangesien droog kan lei tot hoë nie-spesifieke vlekke.
Hoe optimaliseer jy immunofluoressensie?
Immunofluoressensiemikroskopie: 10 tegniese wenke vir sukses
- Selfiksasie en permeabilisering. …
- Teenliggaam Spesifisiteit. …
- Gebruik die toepaslike teenliggaampieverdunning. …
- Optimalisering van buffers en blokkeeragente. …
- Gebruik van 'n gepaste seldigtheid. …
- Veelvoudige kleuring. …
- Sekondêre teenliggaampies. …
- Verminder agtergrond.
Wat veroorsaak agtergrondkleuring?
Agtergrondkleuring kan veroorsaak word deur onvanpaste teenliggaampiesbinding of deur foute tydens die voorbereiding van die weefselskyfie.
Verminder sekondêre teenliggaampies agtergrondseine?
F(ab) spesifieke sekondêre teenliggaampies kan help om agtergrondsein te verminder deur die uitskakeling van niespesifieke binding van die IgG-proteïene wat in weefsels deur die sekondêre teenliggaam gevind word.
