Beperkingsvertering word bewerkstellig deur inkubasie van die teiken-DNA-molekule met beperking ensieme - ensieme wat spesifieke DNS-volgordes herken en bind en by spesifieke nukleotiede klief, hetsy binne die herkenningsvolgorde of buite van die herkenningsvolgorde.
Hoe verteer beperkingsensieme?
Restriction Enzyme Digest Protocol
- Voeg komponente by 'n skoon buis in die volgorde wat gewys word: …
- Inkubeer die reaksie by verteringtemperatuur (gewoonlik 37 °C) vir 1 uur.
- Stop die vertering deur hitte-inaktivering (65 °C vir 15 minute) of byvoeging van 10 mM finale konsentrasie EDTA.
Verteer beperkingsensiem DNA?
Beperkingsensieme kan ook gebruik word om versoenbare punte op PCR-produkte te genereer. … In alle gevalle word een of meer beperkingsensieme gebruik om die DNA te verteer watin óf nie-rigting- óf rigtinggewende invoeging in die versoenbare plasmied is.
Hoe werk DNS-beperkingsensieme?
Hoe werk beperkingsensieme? Soos alle ensieme, werk 'n beperkingsensiem deur vorm-tot-vorm-passing Wanneer dit in aanraking kom met 'n DNS-volgorde met 'n vorm wat ooreenstem met 'n deel van die ensiem, wat die herkenningsplek genoem word, dit vou om die DNS en veroorsaak 'n breuk in beide stringe van die DNS-molekule.
Watter ensiem verteer DNA?
Hierdie ensieme word beperking-endonukleases of restriksie-ensieme genoem, en hulle is in staat om DNS-molekules te splits op die posisies waar spesifieke kort reekse van basisse teenwoordig is.
