Riglyne vir die ontdooi van selle
- Ontdooi bevrore selle vinnig (< 1 minuut) in 'n 37°C waterbad.
- Verdun die ontdooide selle stadig voordat jy dit inkubeer, met voorafverwarmde groeimedium.
- Plaat ontdooide selle teen hoë digtheid om herstel te optimaliseer.
- Gebruik altyd behoorlike aseptiese tegniek en werk in 'n laminêre vloeikap.
Waarom word selle ontdooi?
Dit is noodsaaklik om selle korrek te ontdooi om die lewensvatbaarheid van die kultuur te behou en die kultuur in staat te stel om vinniger te herstel. Sommige kriobeskermingsmiddels, soos DMSO, is giftig bo 4 °C. Daarom is dit noodsaaklik dat kulture vinnig ontdooi en in kultuurmedium verdun word om die toksiese effekte te minimaliseer.
Wat is die proses van ontdooiing?
Ontdooiing is die proses om 'n bevrore produk van bevrore na 'n temperatuur (gewoonlik bo 0°C) te neem waar daar geen oorblywende ys is nie, d.w.s. "ontdooi". Ontdooi word dikwels beskou as bloot die omkeer van die vriesproses.
Wat is die beste manier om selle te vries?
Vries die selle stadig deur die temperatuur teen ongeveer 1°C per minuut te verminder deur 'n beheerde-tempo-kriofrieskas of 'n krioevrieshouer soos Mnr. Frosty,” beskikbaar by Thermo Scientific Nalgene labware (Nalge Nunc). Gebruik altyd die aanbevole vriesmedium.
Hoe ontdooi jy 'n primêre sel?
Vee die buitekant van die bottel met selle af met 70% etanol of isopropanol. In 'n bioveiligheidskas, draai die doppie 'n kwartslag om interne druk te verlig en trek dan weer vas. Ontdooi selle vinnig in 'n 37°C waterbad deur die flessie liggies te draai. Verwyder die flessie wanneer 'n klein hoeveelheid ys oor is.
